Description of the training activity
- Acquérir et renforcer les bases théoriques de la microscopie photonique
- Approfondir et maîtriser l'utilisation pratique d'un microscope plein champ et confocal
- Intégrer les principes et possibilités des nouvelles applications et développements en microscopie
photonique
- Comprendre les complémentarités des techniques de la microscopie conventionnelle à la super-résolution
PROGRAMME
Cours
- Rappels de microscopie conventionnelle, vidéomicroscopie
- Introduction à la microscopie confocale
- Microscope confocal rapide à disque de Nipkow (Spinning-Disk)
- Comprendre et utiliser les fluorochromes en microscopie confocale, protéines et sondes fluorescentes
- Préparation des échantillons biologiques vivants et fixés
- Traitement et utilisation d'images 2D et 3D appliqués à la microscopie
- Applications particulières en microscopie confocale, FLIM, FRET, etc.
- Résolution augmentée et super-résolution (PALM, STORM, STED, SIM)
- Séminaires d'application
Travaux pratiques
Un cycle de dix travaux pratiques sur vingt heures permettra de renforcer le lien entre théorie et
applications, de reconnaître les éléments mis en oeuvre, d'acquérir des images, de les traiter et de les
analyser avec ImageJ notamment.
Une journée sera également dédiée à la découverte de techniques avancées telles que l’excitation
biphotonique, la microscopie en feuillet de lumière, les F-techniques (FRAP, photoactivation) et la
déconvolution.
Une séance pratique d'acquisition d'images peut être programmée sur les échantillons apportés par
les stagiaires à des fins pédagogiques. Pour connaitre les possibilités de stockage des échantillons,
veuillez prendre contact avec le responsable de la formation. "Happy Hour", le mardi à 18h15
EQUIPEMENTS
Microscopes : Leica SP8 et SP8X-Falcon, Spinning-Disk, Nikon N-STORM
Logiciels : MetaMorph, ImageJ, Huygens déconvolution