Atelier de microscopie confocale 2024

Description of the training activity

OBJECTIFS
– Acquérir et renforcer les bases théoriques de la microscopie photonique
– Approfondir et maîtriser l’utilisation pratique d’un microscope plein champ et confocal
– Intégrer les principes et possibilités des nouvelles applications et développements en microscopie photonique
– Comprendre les complémentarités des techniques de la microscopie conventionnelle à la super-résolution

PUBLICS
Chercheurs, ingénieurs, techniciens
Prérequis : une expérience en microscopie photonique est essentielle.

PROGRAMME
Cours (40 % du temps)
– Rappels de microscopie conventionnelle, vidéomicroscopie
– Introduction à la microscopie confocale (physique de l’instrument, acquisition, numérisation, échantillonnage, multiples marquages)
– Microscope confocal rapide à disque de Nipkow (Spinning-Disk)
– Comprendre et utiliser les fluorochromes en microscopie confocale, protéines et sondes fluorescentes
– Préparation des échantillons biologiques vivants et fixés
– Traitement et utilisation d’images 2D et 3D appliqués à la microscopie
– Applications particulières en microscopie confocale, FLIM, FRET, etc.
– Résolution augmentée et super-résolution (PALM, STORM, STED, SIM)
– Séminaires d’application
Travaux pratiques (60 % du temps)
Un cycle de dix travaux pratiques sur vingt heures permettra de renforcer le lien entre théorie et applications, de reconnaître les éléments mis en œuvre, d’acquérir des images, de les traiter et de les analyser avec ImageJ notamment.
Une journée sera également dédiée à la découverte de techniques avancées telles que l’excitation biphotonique, la microscopie en feuillet de lumière, les F-techniques (FRAP, photoactivation) et la déconvolution.