Description of the training activity
OBJECTIFS
- Acquérir les bases théoriques de la microscopie électronique en transmission (MET) nécessaires pour une exploration fonctionnelle de la cellule
- Appréhender les différentes techniques de préparation des échantillons associées à la MET
- Apprendre à préparer son propre échantillon
PUBLICS
Chercheurs, ingénieurs et techniciens des secteurs public et privé, intéressés par la résolution ultrastructurale de la MET et les approches de microscopie corrélative en biologie cellulaire
Afin d'adapter le contenu du stage aux attentes des stagiaires, un questionnaire téléchargeable ICI devra être complété et renvoyé au moment de l'inscription.
PRÉREQUIS
Stage ouvert aux débutants et aux utilisateurs réguliers
PROGRAMME
Cours et séminaires d'application (8 h)
- Les électrons en imagerie
- Préparation des échantillons, immunomarquages
- Traitement des petites particules : coloration négative et cryo-microscopie
- La 3D en microscopie électronique
- Séminaires d'application par 2 invités extérieurs
Ateliers (16 h)
- 1 : fixation chimique, déshydratation et inclusion en résine (4 h)
- 2 : ultramicrotomie (coupes semi-fines et ultra-fines) (4 h)
- 3 : coloration négative et microscope électronique (2 h)
- 4 : cryofixation sous haute pression et cryo-susbtitution (2 h)
- 5 : charte de préparation des échantillons (2 h)
- 6 : TP à la carte (au choix : cryo-microscopie, cryo-ultramicrotomie, tomographie, initiation à ImageJ, préparation des grilles - Formvar, microscopie électronique à balayage - applications) (2 h)
Les stagiaires, après concertation avec les responsables du cours, pourront apporter leur matériel.
EQUIPEMENTS
2 microscopes JEOL1400 120kV et autres équipements Leica pour la préparation des échantillons
Voir le site internet de l'I2BC pour une description détaillée des équipements
INTERVENANTS
Membres du pôle de microscopie électronique de la plateforme Imagerie-Gif (responsable : Claire Boulogne) et 6 intervenants extérieurs